Микробиота грудного молока

На формирование микробиоты кишечника в первые часы и дни постнатальной жизни огромное влияние оказывает характер вскармливания, поскольку ребенок адаптируется к энтеральному типу питания. У детей, получающих грудное вскармливание, количество бифидобактерий вдвое больше, чем у детей, находящихся на искусственном вскармливании, и бифидобактерии занимают у них доминирующее положение в течение первых нескольких недель жизни. Микробный профиль кишечника детей при грудном вскармливании характеризуется выраженным разнообразием, и наряду с представителями бифидобактерий (B.breve, B.bifidum, B.longum), которые составляют до 60-90% от общей фекальной микробиоты, выделяются энтерококки, энтеробактерии, вейллонеллы [5]. Микробный профиль кишечника детей при искусственном вскармливании характеризуется преобладанием строгих и факультативных анаэробов, таких как Бактероиды иКлостридии, а также Стафилококки, Стрептококки и Энтеробактерии, с более поздней колонизацией бифидобактериями. 

Профиль микробного заселения кишечника детей с различным характером вскармливания обусловлен рядом факторов, включая наличие собственной микрофлоры молока и олигосахаридов, которые являются пребиотиками для основных представителей микробиоты кишечника, включая бифидо- и лактобактерии. До недавнего времени считалось, что грудное молоко стерильно, однако обнаружение в составе грудного молока бактерий в количестве от 103 до 104 КОЕ/мл позволило сформулировать такое понятие, как «микробиом грудного молока», и показало влияние грудного вскармливания, как естественного «персонифицированного» пре- и пробиотика, на формирование микробиоты кишечника ребенка[6]. 

Микробы грудного молока одни из первых колонизируют кишечник новорожденного и влияют на близкие и отдаленные состояния здоровья ребенка.  В настоящее время проводятся работы по изучению микробиоты молока во всем мире, изучаются различные группы женщин, а также различные возрастные периоды. Среди ранних исследований по изучению микробиоты применялись методы полимеразной цепной реакции РНК (ПЦР), которые показали наличие часто встречаемых колоний Стафилококков, Стрептококков, Пропионибактерий и охарактеризовали эти колонии как основу микробиоты молока[7]. 

Далее представлены выдержки из работ по изучению микробного состава грудного молока, они различаются по выборке, по методам исследования, но каждое из них вносит свой вклад в информационную базу о микробиоте материнского молока. 

 Исследование 2009 года, Colladoetal, Испания. Изучались образцы грудного молока от 50 здоровых матерей, молоко собрано ручным методом, аспептично, и заморожено. Методом ПЦР в реальном времени выявили большое количество ДНК микроорганизмов в грудном молоке и идентифицировали преимущественно Бифидобактерии, Лактобактерии, Стафилококки и Стрептококки[8]. 

Исследование 2012 года, Cabrera- Rubioetal, Финляндия. Изучали образцы молока от 18 женщин, 8 из них здоровы и 10 с ожирением. Асептически собранное молоко на 2е сутки, в 1 и 6 месяц после родов хранили при глубокой заморозке. Результаты показали, что микробный состав меняется со временем: в молозиве преобладают группы Лактобактерий, причем они содержатся в гораздо большем количестве, чем в других образцах. Индекс массы тела также влияет на микробный состав грудного молока: у матерей с ожирением в молозиве Лактобактерии преобладали особенно, а в образцах 6-месячных преобладали Стафилококки, Лактобактериии былоснижено число Бифидобактерий. Кроме того, на состав микробиоты влиял выраженный набор массы в беременность- увеличивалось число золотистого стафилококка. Помимо этого, были высказаны гипотезы о способе попадания микроорганизмов в грудное молоко. Одна из них, существовавшая ранее, об энтеромаммарном пути (через лимфоидную слизистую систему определенные микроорганизмы из кишечника матери попадают в молочные железы), в данном исследовании не нашла подтверждения, так как микробиота кишечника и грудного молока женщин не соответствовали друг другу.  Еще одной теорией является попадание микробов в грудное молоко с кожи и рта младенцев, но было обнаружено, что микробный состав молозива уже за неделю до родов примерно соответствует молозиву после родов, а вот в 1 и 6 месяцев образцы имеют микрофлору, свойственную ротовой полости младенцев, что говорит о возможном занесении дополнительной нужной флоры в молочные протоки матери[9]. 

Tuzunetal, в Турции 2013 год, оценивали влияние микробиоты грудного молока на течение желтухи грудного молока. В исследование вошли образцы от 60 матерей, у половины были доношенные дети с так называемой «желтухой грудного молока», в контрольной группе- здоровые доношенные дети. Молоко собирали асептически, ручным методом, одновременно с двух сторон с 1 по 28 день жизни и затем хранили при глубокой заморозке. Было выявлено, что в группе контроля грудное молоко содержало большее количество бифидобактерий (штаммы Вadolescentis, Bbifidum, andBlongum) Концентрации Бифидобактерийбифидум в молоке и фекалиях коррелировали между собой. И кроме того, концентрация обнаруженных штаммов бифидобактерий отрицательно коррелировала с уровнем билирубина у младенцев. Таким образом был сделан вывод о роли бифидобактерий в развитии желтухи грудного молока[10]. 

Khodayar-Parto et al, 2014, Испания. Изучали отличиямикробиоты грудного молока в зависимости от стажа кормления, гестационного возраста детей, а также способа рождения. В исследовании принимали участие 13 матерей с доношенными детьми и 19 с преждевременно рожденными малышами, также их поделили на другую группу по методу родоспоможения: 15- вагинальные роды и 17- кесарево сечение. Изучались образцы молока в первые три недели (1-5, 6-15, и 17 сутки). Преобладающей флорой были Бифидобактерии, Лактобактерии, Стафилококки и Энтерококки, причем микробное число увеличивалось со временем. Кроме того, количество бактерий было обнаружено в большем числе у недоношенных детей и у детей, рожденных при помощи кесарева сечения, но преобладала условно-патогенная флора, аБифидобактерии все же преобладали у доношенных детей и у детей, рожденных естественным путем. Был сделан вывод, что способ рождения и гестационный возраст влияют на микробиоту грудного молока и соответственно на микробиоту кишечника ребенка, что может также иметь влияние на иммунную систему[11]. 

2015, Испания, Olivaresetal, изучали влияние целиакии у матерей на микробиоту грудного молока. В исследовании участвовали 24 женщины, 50/50 здоровые и имеющие диагноз целиакия. Изучали уровни иммуноглобулина А, олигосахаридов, цитокинов и флору в грудном молоке, а также их возможное влияние на развитие целиакии у ребенка. Грудное молоко от матерей с целиакией содержало значительно меньшее количество Интерлейкина 12p70, трансформирующего фактора роста и секреторного иммуноглобулина А, интерферона гамма, а также меньшее число копий Бифидобактерий. Эти факторы выполняют важные защитные иммунные функции, а их низкое количество теоретически снижает защитные эффекты на развитие у детей целиакии в будущем[12]. 

Huntetal, США, 2011 год. В исследование включили 16 здоровых женщин, у которых асептично собирали грудное молоко при помощи электронноно молокоотсоса 4 раза в течение 4 недель. При помощи новой техники секвенирования генов были обнаружены 9 основных видов бактерий, которые присутствовали во всех образцах: Стафилококки, Стрептококки, Серраты, Псеудомоны, Коринебактерии, Ралстонии, Пропионибактерии, Сфингомоны, Брадиризобиумы. И таким образом, высказали предположение об относительно постоянном составе микробиоты грудного молока[13]. 

Jostetal, 2013 год, Швейцария. Методом секвенирования генов были изучены образцы грудного молока от 7 здоровых женщин, которые родили естественным путем. Молоко аспетически собрано 3 раза за первый месяц (3-6, 9-14,25-30 дни после родов). ПреоладающейфлоройбылиобнаруженыСтафилококки, Стрептококки, Пропионибактерии (>90%), значительные популляции облигатных анаэробов, включая Бифидобактрии и Вейлонеллы.Данноеисследованиепозволяетпредполагать, чтогрудноемолокоявляетсяосновнымисточникомбактериальногоразнообразиявкишечникеноворожденного[14].  

2015, Испания, Jimenezetalвыяснили различия в метагеноме грудного молока у здоровых женщин и женщин с маститами. 10 здоровых женщин и 10женщин, страдающих маститами асептично сцеживали грудное молоко ручным методом. ПолученныеДНКсеквенировалииизучалиихсвойства. Во всех образцах преобладали человеческие ДНК, ≥ 90%. Образцы от здоровых женщин содержали Стафилококки, Стрептококки, Бактероиды, Фекобактерии, Руминококки, Лактобактерии и Пропионибактерии, причем процент бактерий у женщин сильно разнообразен. Ученыеотметили, чтоЗолотистыйСтафилококкпреобладалвобразцахотженщинсострыммаститом, аЭпидеримальныйСтафилококквобразцахот женщин с хроническим маститом.  Грибковаяипротозойнаяфлорабылатакжеобнаруженавовсехобразцах, втовремякакАрхеи отсутствовали в образцах от женщин с маститами.  Кроме этого были найдены различные вирусы, их роль требует дальнейшего изучения. Таким образом, сделан вывод, что микробиом грудного молока это не только различные бактерии, но и другие формы жизни[15]. 

Williamsetal, 2017, США, изучали влияние нутритивного статуса на микробиом грудного молока женщин. Асептично собранное грудное молоко от 21 здоровой  женщины, 9 образцов от 2 дня до 6 месяцев после родов, с полным описанием их диеты в течение 24 часов. Женщин разделили на группы с нормальным весом и ожирением. Результаты: Микробиом грудного молока был относительно постоянным во все периоды, хотя некоторые изменения все же имеются. У женщин с ожирением в наибольших количествах обнаруживались Гранулоцителлы. А также, были найдены различия в грудном молоке в зависимости от диеты, например, употребление полиненасыщенных жирных кислот обратно пропорционально количеству Коринебактерий. Употребление углеводов в целом, дисахаридов и лактозы обратно пропорционально Фирмикутам, а белка- позитивно коррелирует с Гемелла. Полученные данные позволяют предполодить, что диета матери может играть ключевую роль в бактериальной заселенности грудного молока. Диета может оказывать это влияние через различные режимы, например, изменяя состав компонентов молока или сочетание определенных групп бактерий в желудочно-кишечном тракте матери. Направление требует дальнейшего изучения[16]. 

2019 год, Нидерланды, PamelaD. Browneetal. Поиск связи между микробиотой грудного молока и развитием психологических расстройств (тревожность, депрессия). В исследовании приняли участие 51 женщина, которые имели доношенную беременность, после родов не имели каких-либо осложнений, не принимали лекарственные средства. Образцы молока, собранного асептически, ручным методом в 2 6 и 12 недель после родов, были заморожены. В 6 недель матери заполняли анкету, где отмечались симптомы стресса, тревоги, депрессии. Во всех образцах отмечалось повышенное содержание Лактобактерий и снижение Стафилококков, вне зависимости от срока сцеженного молока и уровня тревожности. У 13 женщин с высоким уровнем депрессии и у 13 женщин с низким уровнем депрессии не было обнаружено значительных качественных различий в микробиоте грудного молока. Однако, значительно больше поколений Фирмикутов, Протеобактерий, Бактероидов, Ацинетобактера и Флавобактерий были выявлены у женщин низким уровнем тревоги. У женщин с высоким уровнем тревожности значительно ниже количественный состав микробиоты в сравнении с женщинами с низким уровнем тревожности. Данное исследование предполагает потенциальную связь между уровнем психологических расстройств матери и микробиотой грудного молока, показывая возможные механизмы влияния депрессии матери на здоровье и развитие новорожденного[17].